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低溫電轉(zhuǎn)儀和高溫電轉(zhuǎn)儀是分子生物學(xué)領(lǐng)域用于細(xì)胞電穿孔轉(zhuǎn)化的核心設(shè)備，二者工作原理的核心都是利用高壓電場(chǎng)擊穿細(xì)胞膜形成微孔，使外源核酸（DNA/RNA）進(jìn)入細(xì)胞，但在溫度控制邏輯、電場(chǎng)參數(shù)設(shè)計(jì)、適用場(chǎng)景上存在本質(zhì)差異，以下是詳細(xì)拆解：一、核心共性：電轉(zhuǎn)儀的基礎(chǔ)工作原理無(wú)論是低溫還是高溫電轉(zhuǎn)儀，本質(zhì)都是基于電穿孔技術(shù)，核心流程和原理一致：電場(chǎng)穿孔：將細(xì)胞與外源核酸混合液置于電轉(zhuǎn)杯（電極杯）中，施加瞬時(shí)高壓電場(chǎng)（幾百至幾千V/cm），細(xì)胞膜在電場(chǎng)力作用下發(fā)生極化，形成納米級(jí)可逆微孔...

低溫電轉(zhuǎn)儀與高溫電轉(zhuǎn)儀的核心差異圍繞“控溫邏輯、適配樣本、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景”展開(kāi)，本質(zhì)是通過(guò)溫度調(diào)控平衡“細(xì)胞膜穿孔效率”與“樣本活性保留”，以下是簡(jiǎn)潔明了的區(qū)別解析：一、核心設(shè)計(jì)差異：控溫方式與目的低溫電轉(zhuǎn)儀：自帶制冷模塊（制冷片/液氮預(yù)冷），工作溫度穩(wěn)定在2-8℃，核心目的是“降溫護(hù)活”——電擊時(shí)電場(chǎng)會(huì)產(chǎn)生瞬時(shí)熱量，低溫可抑制樣本（尤其是細(xì)胞）因熱損傷死亡，同時(shí)減少核酸降解。高溫電轉(zhuǎn)儀：無(wú)主動(dòng)制冷，依賴加熱模塊或環(huán)境升溫，工作溫度多在37-42℃，核心目的是“升溫促轉(zhuǎn)”——高溫可...

電轉(zhuǎn)儀的核心工作原理是利用高壓脈沖電場(chǎng)在細(xì)胞膜上形成瞬時(shí)微孔，使外源物質(zhì)（如DNA、RNA、蛋白質(zhì)）快速進(jìn)入細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)高效的細(xì)胞轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染，以下是通俗且清晰的原理拆解：1.核心前提：細(xì)胞膜的通透性變化正常情況下，細(xì)胞膜具有選擇透過(guò)性，外源大分子（如質(zhì)粒DNA）無(wú)法自由進(jìn)入細(xì)胞。高壓電場(chǎng)的作用是暫時(shí)改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，為外源物質(zhì)提供進(jìn)入通道。2.關(guān)鍵步驟：從電場(chǎng)施加到物質(zhì)進(jìn)入樣品準(zhǔn)備：將待轉(zhuǎn)化的細(xì)胞與外源物質(zhì)（如DNA溶液）均勻混合，加入專用電轉(zhuǎn)杯（電極間距固定，保證電場(chǎng)均勻）。電...

多功能電轉(zhuǎn)儀作為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、分子生物學(xué)研究中的關(guān)鍵設(shè)備，其穩(wěn)定性直接影響實(shí)驗(yàn)成功率與數(shù)據(jù)可靠性。本文針對(duì)用戶反饋的典型故障現(xiàn)象，結(jié)合技術(shù)原理提供系統(tǒng)性排查方案，幫助科研人員快速定位問(wèn)題并恢復(fù)儀器性能。一、電源異常類故障解析當(dāng)多功能電轉(zhuǎn)儀出現(xiàn)無(wú)法開(kāi)機(jī)或自動(dòng)關(guān)機(jī)現(xiàn)象時(shí)，首先檢查供電系統(tǒng)穩(wěn)定性。使用萬(wàn)用表測(cè)量輸入電壓是否在允許波動(dòng)范圍內(nèi)，特別要注意實(shí)驗(yàn)室穩(wěn)壓電源的實(shí)際輸出能力。此時(shí)應(yīng)重點(diǎn)觀察電源指示燈閃爍頻率，若呈現(xiàn)不規(guī)則閃動(dòng)則可能是內(nèi)部濾波電容老化失效的表現(xiàn)。保險(xiǎn)絲熔斷是另一常見(jiàn)誘...

CURVATURE類囊體1（CURT1）家族的植物蛋白及其原核CurT同源物是葉綠體和藍(lán)藻中類囊體膜系統(tǒng)三維結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵決定因素。由于CURT1/CurT家族的進(jìn)化起源似乎與類囊體本身的進(jìn)化一致，因此塑造類囊體系統(tǒng)已被廣泛認(rèn)為是它們的主要作用。在這項(xiàng)研究中，我們提供了強(qiáng)有力的證據(jù)，表明CurT除了調(diào)節(jié)類囊體結(jié)構(gòu)之外，還參與了聚囊藻屬PCC6803和SynechococcuselongatusPCC7942的細(xì)胞分裂和類囊體裂變/分配，可能是通過(guò)與關(guān)鍵細(xì)胞分裂蛋白FtsZ的物理相...

低溫電轉(zhuǎn)儀的工作原理核心是利用低溫環(huán)境保護(hù)細(xì)胞活性，同時(shí)通過(guò)高壓脈沖電場(chǎng)在細(xì)胞膜上形成可逆孔道，使外源核酸（如DNA、RNA）進(jìn)入細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)化。1.核心機(jī)制：電穿孔效應(yīng)這是電轉(zhuǎn)儀的基礎(chǔ)工作原理，分為三個(gè)關(guān)鍵步驟：電場(chǎng)施加：儀器向含有細(xì)胞和外源核酸的電轉(zhuǎn)杯施加短時(shí)、高壓的脈沖電場(chǎng)。電場(chǎng)強(qiáng)度通常在1-30kV/cm，脈沖時(shí)間從微秒到毫秒級(jí)不等，具體參數(shù)需根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整。細(xì)胞膜穿孔：高壓電場(chǎng)會(huì)破壞細(xì)胞膜的磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)，使其產(chǎn)生瞬時(shí)、可逆的微孔（即“電穿孔”）。這些微孔的...

在精密儀器、醫(yī)療設(shè)備及半導(dǎo)體制造等領(lǐng)域，TEC溫控板因其精準(zhǔn)的溫度控制能力被廣泛應(yīng)用。然而，長(zhǎng)期高負(fù)荷運(yùn)行下難免出現(xiàn)各類故障，影響系統(tǒng)穩(wěn)定性和設(shè)備壽命。本文將針對(duì)過(guò)載保護(hù)觸發(fā)、傳感器失效等典型問(wèn)題提供系統(tǒng)性排查方法與解決方案，助力工程師快速恢復(fù)設(shè)備正常運(yùn)行。一、過(guò)載保護(hù)機(jī)制解析與應(yīng)對(duì)策略當(dāng)電流超過(guò)額定值時(shí)，TEC溫控板內(nèi)置的保護(hù)電路會(huì)主動(dòng)切斷電源以防止器件損壞。此時(shí)LED顯示屏通常顯示“OL”或“PROT”報(bào)警代碼。首先應(yīng)檢查負(fù)載端是否存在短路現(xiàn)象——使用萬(wàn)用表逐段測(cè)量導(dǎo)線電...

細(xì)胞外囊泡是一組參與細(xì)胞間通訊的異質(zhì)膜結(jié)合囊泡，在質(zhì)膜（外泌體）或通過(guò)內(nèi)吞作用（外泌體）形成。迄今為止，大多數(shù)外泌體研究都集中在體外系統(tǒng)或源自體液的外泌體上，而組織源性的外泌體仍未得到充分探索。在這里，我們提出了一種使用細(xì)胞類型特異性啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的報(bào)告基因構(gòu)建體的方案，用于靶向標(biāo)記和隨后從小鼠組織體內(nèi)特定細(xì)胞類型中分離外泌體。由于目前主要基于大小、密度或表面標(biāo)記的分離技術(shù)的局限性，外泌體和外泌體之間的區(qū)分仍然具有挑戰(zhàn)性。為了解決這個(gè)問(wèn)題，我們的方法利用基因工程來(lái)特異性標(biāo)記外泌體...

當(dāng)實(shí)驗(yàn)室里的體外電轉(zhuǎn)儀突然亮起警示燈或無(wú)法正常工作時(shí)，許多科研人員的第一反應(yīng)可能是聯(lián)系廠商維修。但其實(shí)大部分常見(jiàn)故障都可以通過(guò)基礎(chǔ)排查和簡(jiǎn)單操作自行解決。掌握這些技能不僅能節(jié)省時(shí)間成本，更能避免因設(shè)備停機(jī)影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。以下是針對(duì)該設(shè)備典型問(wèn)題的系統(tǒng)性解決方案。電源問(wèn)題是引發(fā)故障的常見(jiàn)原因之一。若體外電轉(zhuǎn)儀無(wú)響應(yīng)，首先要檢查插座是否通電，可嘗試更換其他電器驗(yàn)證電源接口有效性。部分型號(hào)配備獨(dú)立保險(xiǎn)絲裝置，位于機(jī)身背面或底部隱蔽位置，用十字螺絲刀小心打開(kāi)保護(hù)蓋后即可查看。發(fā)現(xiàn)熔斷時(shí)...

在現(xiàn)代生命科學(xué)與生物技術(shù)領(lǐng)域，流式電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)猶如一顆璀璨的明珠，散發(fā)著耀眼的光芒。它所涉及的技術(shù)原理和應(yīng)用場(chǎng)景，對(duì)于許多科研工作者以及相關(guān)領(lǐng)域的從業(yè)者來(lái)說(shuō)，都有著至關(guān)重要的意義。流式電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的核心在于其巧妙地利用了電場(chǎng)的作用來(lái)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。當(dāng)細(xì)胞懸浮在特定的緩沖液中時(shí)，施加適當(dāng)?shù)碾妶?chǎng)脈沖，會(huì)在細(xì)胞膜上形成微小的孔隙。這些孔隙就像是臨時(shí)開(kāi)啟的“通道”，使得外源物質(zhì)，比如核酸分子等，能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。這一過(guò)程看似簡(jiǎn)單，實(shí)則蘊(yùn)含著精密的科學(xué)設(shè)計(jì)。電場(chǎng)的強(qiáng)度、脈沖的時(shí)間和次數(shù)等參...

瘤內(nèi)免疫療法（ITIT）致力于通過(guò)直接刺激腫瘤中的免疫系統(tǒng)來(lái)逆轉(zhuǎn)局部腫瘤介導(dǎo)的免疫抑制，從而產(chǎn)生有效的抗腫瘤免疫。使用體內(nèi)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染作為瘤內(nèi)癌癥免疫療法的白細(xì)胞介素12（IL-12）的體內(nèi)表達(dá)進(jìn)入轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的II期臨床試驗(yàn)，但臨床成功率有限。我們?cè)噲D通過(guò)在編碼IL-12的質(zhì)粒治療中加入表達(dá)CD154（CD40配體）的質(zhì)粒來(lái)提高體內(nèi)IL-12電穿孔的療效，并評(píng)估對(duì)實(shí)體瘤的療效。患有皮內(nèi)B16F10黑色素瘤或MC38小鼠結(jié)腸癌腫瘤的小鼠每周接受2次瘤內(nèi)（IT）注射編碼IL-12...

突出第一次全面表征永生化T細(xì)胞系CTLL-2和HT-2。質(zhì)粒電穿孔可實(shí)現(xiàn)高效且具有成本效益的T細(xì)胞工程。用于T細(xì)胞電穿孔的優(yōu)化轉(zhuǎn)基因啟動(dòng)子和質(zhì)粒結(jié)構(gòu)。多功能轉(zhuǎn)基因遞送策略簡(jiǎn)化了T細(xì)胞工程工作流程。用于精確T細(xì)胞工程的高效CRISPR/Cas9基因組編輯工具包。摘要轉(zhuǎn)基因T細(xì)胞療法最近的臨床成功凸顯了加速T淋巴細(xì)胞基礎(chǔ)研究和功能篩選方法的迫切需要。然而，一種簡(jiǎn)單且具有成本效益的T細(xì)胞高效基因工程方法仍然難以捉摸。目前的方法通常依賴于病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)，這是勞動(dòng)密集型的，需要嚴(yán)格的生物安全...